分析柱是色譜分析技術(shù)中的核心部件,其基本工作原理基于不同化合物在固定相和流動(dòng)相之間的分配差異。當(dāng)樣品被載氣或流動(dòng)相帶入色譜柱后,其中的各組分在流動(dòng)的載氣(流動(dòng)相)和固定在柱內(nèi)的固定相之間進(jìn)行反復(fù)分配。由于不同化合物與固定相的相互作用力存在差異,它們在色譜柱中的遷移速度也各不相同。與固定相作用力強(qiáng)的化合物會(huì)停留更長時(shí)間,而作用力弱的化合物則遷移較快。這種差異化的分配過程使得原本混合在一起的化合物得以逐步分離,按照不同的保留時(shí)間依次流出色譜柱。色譜柱內(nèi)部精密的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)確保了分離過程的重現(xiàn)性。
分析柱的優(yōu)點(diǎn):
1.高靈敏度:善于分離微量的化合物。
2.選擇性強(qiáng):可以實(shí)現(xiàn)高選擇性的分離和計(jì)量。
3.可逆性強(qiáng):可以反復(fù)分離相同的分子并提供準(zhǔn)確的結(jié)果。
4.可重現(xiàn)性好:結(jié)果可重現(xiàn)且穩(wěn)定,使得分析結(jié)果得到保證。
5.兼容性好:可以適用于多種樣品的分離。
6.易于操作:使用方便簡單易行,適用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各種應(yīng)用。
7.穩(wěn)定性和耐用性:分析柱具有良好的穩(wěn)定性和耐用性,能夠長期保持穩(wěn)定的性能,減少更換和維護(hù)成本。
分析柱的測定步驟:
-如果樣品是液體,通常直接進(jìn)樣。如果是固體樣品(如食品),可能需要提取乙醇。對(duì)于復(fù)雜樣品,可能需要稀釋或過濾。
-常用的液相色譜柱為C18反相色譜柱。選擇適當(dāng)?shù)闹訉?duì)乙醇及其他組分的分離非常關(guān)鍵。
-流動(dòng)相通常選擇水和有機(jī)溶劑(如乙腈或甲醇)混合物,乙醇分析中,水-乙腈(或水-甲醇)的梯度洗脫系統(tǒng)較為常見。
-折光檢測器(RI):對(duì)所有有機(jī)物敏感,但不適用于高濃度溶劑。紫外檢測器(UV):適合吸光特性明顯的化合物,但乙醇不易被紫外線檢測到,通常不使用。
-使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后通過乙醇的峰面積進(jìn)行定量。
-液相色譜可以較好地處理復(fù)雜樣品中的乙醇含量,尤其是在有多種溶質(zhì)的情況下。通過峰面積可以定量分析。