分析柱作為色譜分析技術(shù)的關(guān)鍵組件，憑借其精妙的工作原理，在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出了其性能和廣泛的應(yīng)用價(jià)值。從液相色譜分析柱到糖分析柱，不同類型的分析柱針對(duì)不同性質(zhì)的化合物，實(shí)現(xiàn)了準(zhǔn)確的分離。
 

　　1.液相色譜分析柱：液相色譜分析柱實(shí)質(zhì)上是一種分離柱，它在某些條件下會(huì)將待分離化合物分離并分解成組成相同的組分，分離過(guò)程是分子在固定相和流動(dòng)相間的分配過(guò)程，流動(dòng)相沿著固相表面吸附產(chǎn)生分離。液相色譜柱的固定相是微細(xì)的顆粒，具有高度的表面積，通過(guò)顆粒通道可以與流動(dòng)相及待分離化合物交互作用，它們通過(guò)靜電作用，疏水/親水性原理，分子量篩選或手性選擇等原理，將待分離的化合物分離出來(lái)。
 

　　2.糖分析柱：糖分析柱的分離原理主要基于配體交換反應(yīng)。糖分子上的羥基可被去質(zhì)子化而帶有負(fù)電荷，這些負(fù)電荷與樹(shù)脂表面上的金屬離子(如鈣、鉛等抗衡離子)的正電荷之間相互作用，使糖被保留在固定相上。通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相條件(如pH值、離子強(qiáng)度等)，可以實(shí)現(xiàn)不同糖類分子間的吸附與解吸平衡，從而達(dá)到分離的目的。此外，部分糖分析柱還結(jié)合了尺寸排阻、分配吸附等多種分離模式，進(jìn)一步提高了分離效果。

 

　　分析柱的使用注意事項(xiàng)：
 

　　1.避免壓力和溫度的急劇變化及機(jī)械震動(dòng)
 

　　-溫度和壓力的突然改變，以及機(jī)械震動(dòng)，都可能破壞色譜柱內(nèi)的固定相結(jié)構(gòu)，影響分離效果。因此，在操作過(guò)程中應(yīng)保持平穩(wěn)的壓力和溫度條件，并防止強(qiáng)烈的機(jī)械沖擊。
 

　　2.確保流動(dòng)相潔凈
 

　　-每隔24-48小時(shí)就應(yīng)新配水相流動(dòng)相，并同時(shí)更換或仔細(xì)清洗流動(dòng)相溶劑瓶，以避免流動(dòng)相長(zhǎng)菌。確保實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)工作正常。
 

　　3.確保樣品不含顆粒型雜質(zhì)
 

　　-如樣品過(guò)臟或有微粒存在，需要考慮適合的樣品制備方法。在使用樣品過(guò)濾器時(shí)，確保濾膜為0.22μm，且與樣品溶劑兼容(不發(fā)生溶解)。也可考慮使用高速離心法去除顆粒性雜質(zhì)。
 

　　4.注意樣品溶液與流動(dòng)相條件的兼容性
 

　　-進(jìn)樣后不應(yīng)發(fā)生沉淀或溶劑不互溶的情況。通常使用流動(dòng)相或比流動(dòng)相洗脫強(qiáng)度弱的溶液(即有機(jī)溶劑比例較低)來(lái)溶解或稀釋樣品，這樣可以獲得優(yōu)異的峰形和檢測(cè)靈敏度。
 

　　5.了解色譜柱的操作使用限度
 

　　-如果所使用的流動(dòng)相條件、柱溫以及樣品溶液條件不利于色譜柱壽命時(shí)，請(qǐng)使用保護(hù)柱以延長(zhǎng)柱壽命。
 

　　6.定期進(jìn)行柱效測(cè)試
 

　　-在色譜柱使用過(guò)程中，定期進(jìn)行柱效測(cè)試，記錄塔板數(shù)與壓力，從而追蹤監(jiān)控色譜柱的性能變化。柱效測(cè)試方法應(yīng)固定。
 

　　7.正確保存色譜柱
 

　　-反相色譜柱應(yīng)保存于合適的高比例或100有機(jī)相(如乙腈或甲醇)中。如色譜柱使用于高溫或PH條件，或停用色譜柱超過(guò)72小時(shí)，用100乙腈保存色譜柱。使用原配的柱堵頭，確保堵頭擰緊以避免柱內(nèi)溶劑揮發(fā)。取放色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。